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ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色譜柱的清洗、再生和存放

更新時(shí)間:2024-10-30      點(diǎn)擊次數(shù):662

a. 清洗與再生

  如果發(fā)生峰形改變、譜峰分叉、出現(xiàn)肩峰、保留時(shí)間改變、分離度變化或柱壓升高,說明色譜柱可能已被污染。通常情況下,用純有機(jī)溶劑進(jìn)行沖洗(小心避免緩沖鹽出現(xiàn)析出)就足以去除污染物。如果沖洗不能解決問題,可采用以下清洗和再生步驟。

  根據(jù)樣品和/或您認(rèn)為污染色譜柱的物質(zhì)的性質(zhì),選擇與之匹配的常規(guī)清洗方法(見表4)。

請(qǐng)使用20倍柱體積的溶劑沖洗色譜柱。升高柱溫可提高清洗效率。

  如果清洗和再生之后色譜柱性能仍然很差,請(qǐng)致電當(dāng)?shù)氐奈痔厥擂k事處獲得更多支持。

4.反相色譜柱清洗順序

         image.png

* 在使用THF或正己烷之前,確保系統(tǒng)與這些溶劑兼容。只有在利用純反相有機(jī)溶劑(如乙腈)無法清洗色譜柱時(shí),方可考慮使用諸如THF或正己烷之類的溶劑。降低流速,使用較低的操作溫度并限盡量減少系統(tǒng)與THF/或正己烷的接觸。

** 使用低有機(jī)溶劑含量的溶液,以避免出現(xiàn)緩沖鹽析出。

 

b. 存放

  如果ACQUITY UPLCACQUITY Premier CSH色譜柱需要在室溫下存放超過四天,應(yīng)將其保存于100%乙腈中。對(duì)于高溫應(yīng)用,請(qǐng)?jiān)谑褂煤罅⒓词褂?/span>100%乙腈保存色譜柱,以便盡可能延長(zhǎng)色譜柱使用壽命。切勿使用緩沖鹽保存色譜柱。如果流動(dòng)相中含有緩沖鹽,則先用10倍柱體積(常規(guī)色譜柱體積請(qǐng)參見表1)的HPLC級(jí)水沖洗ACQUITY UPLCACQUITY Premier CSH色譜柱,再用100%乙腈替換柱內(nèi)的水,然后儲(chǔ)存。如果不執(zhí)行這個(gè)中間步驟,在引入100%乙腈時(shí),色譜柱內(nèi)可能會(huì)出現(xiàn)緩沖鹽析出。將色譜柱完全密封,防止柱床因溶劑蒸發(fā)而變干。

  注:如果色譜柱運(yùn)行了含甲酸鹽(如甲酸銨、甲酸等)的流動(dòng)相,并且之后使用100%乙腈進(jìn)行沖洗,那么在重新安裝色譜柱并再次運(yùn)行含甲酸鹽的流動(dòng)相時(shí),柱平衡花費(fèi)的時(shí)間可能略長(zhǎng)。


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